Cuaderno de prácticas microbiología

Tinción siple de hongos Significado clínico Observación de hifas en los hongos de una mandarina. Material Mechero Bunsen Asa de siembra estériles Bote de orina como cementerio Porta limpio y desengrasado Cubre para porta Azul de lactofenol Safranina Procedimiento 1. Con nuestra asa de siembra estéril tomamos una muestra de hongos de la superficie de la mandarina. 2. Le añadimos a una de las muestras una gota de Azul de lactofenol y extendemos un poco la muestra. 3. Cubrimos las extensiones con un cubreobjetos grande para portaobjetos. 4. Observamos nuestra tinción en el microscopio, primero con el objetivo de 40X y después con el objetivo de 100X. Otra: Material Mechero Bunsen Fiso Bote de orina como cementerio Porta limpio y desengrasado Cubre para porta Azul de lactofenol Safranina Procedimiento: 1. Con un trozo de fiso, lo frotamos por encima de los hongos y tomamos una muestra de la superficie de nuestra placa de Petri

Siembra de hongos de mandarina Material Mechero Bunsen Asa de siembra estériles Bote de orina como cementerio Placa de Petri con medio de cultivo Procedimiento 1.Con un asa de siembra estéril cogemos una muestra de hongo de la superficie de una mandarina. 2. La sembramos introduciendo el asa de siembra suavemente dentro de nuestro medio de cultivo de la placa de Petri.

Filamentación de candidas Significado clínico: Identificación de candida a partir de extensiones vaginales. Material: Mechero Bunsen Asa de siembra estériles Bote de orina como cementerio Tubos de 3 mL con SSF Micropipeta 100-1000 μL Puntas de pipeta estériles Procedimiento 1. Con nuestra asa de siembra estéril tomamos una muestra de nuestra placa con microorganismo. 2. Inoculamos nuestra muestra en 0,5 mL de suero atemperado previamente. 3. Metemos nuestro tubo en la incubadora a 25ºC y esperamos 2 horas para que se produzca la filamentación. Lectura de los resultados:

Exudado vaginal. Significado clínico: Identificación de candida Material Mechero Bunsen Asa de siembra estériles Bote de orina como cementerio Placas de Petri con medios de cultivo: Saburoeau, Mueller Hinton y Chapman. Hisopos estériles Portaobjetos Colorantes tinción de Gram Procedimiento 1.Las compañeras realizan un exudado vaginal con hisopos estériles. 2. Con uno de esos hisopos vamos a realizar una siembra en diferentes placas de Petri, cada una con un medio de cultivo diferente. 3. Tomamos un hisopo que contiene la  muestra, realizamos una línea en la  primera mitad de la placa y extendemos. 4. Seguidamente, realizamos una siembra por  agotamiento de estrías. 5. En un porta limpio y desengrasado añadimos una gota de SSF. 6. Seguidamente,con el hisopo con muestra realizamos la extensión. 7. Realizamos una tinción de GRAM.     Lectura de los resultados: podemos observar a Gardnerella Vaginalis, que forma parte de la flora vaginal

Coprocultivo Significado clínico Identificación de microorganismos en cultivos enriquecidos. Material Mechero Bunsen Asa de siembra estériles Bote de orina como cementerio Placas de Petri con medios de cultivo enriquecidos Hisopos estériles Procedimiento 1. Con un hisopo estéril cogemos muestra de nuestro inóculo nº 4 2. En una placa de Agar S-S, hacemos una raya y sembramos hasta la mitad de la placa con nuestro hisopo. 3. Con un asa estéril, realizamos una siembra por agotamiento de estrias en el resto de la placa. 4. Volvemos a realizar estos pasos en los medios McConkey,  XLD, agar Hecktoen y agar sangre. Lectura de los resultados: Agar S-S: Colonias de color rosa, fermentadoras de lactosa. McConkey: colonias rojas, fermentadoras de manitol. XLD: colonias amarillas, fermentadoras de lactosa. Agar Hecktoen: Colonias de color salmón: E. coli

Urocultivo Significado clínico Permite conocer el numero de colonias, la identificación de bacterias y realización de pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos. Fundamento Lo realizaremos en placas petri con asas calibradas, laminoculltivos que se sumergen en la orina y sistemas automatizados. Procedimiento Siembra aislamiento: En placa petri, a partir de la muestra sin diluir para identificar patógenos causantes de infección. Usamos los medios de: CLED (recuento) sembrando con una asa calibrada de 1 ul, la mitad de la placa para cuantificación y la otra mitad para aislamiento. McConkey , sembrando por agotamiento de estrías y así permitir el aislamiento de Gram (-). Medios cromogénicos: CPS, ESBL... , aislamiento, recuento e identificación directa de E.coli, proteus y enterococos).   Lectura de los resultados Medio de CLED: colonias amarillas: E. coli Medio McConkey: crecimiento, por tanto Gram (-) Medio