PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO EN PLACAS Y TUBO

PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO EN PLACAS Y TUBO

OBJETIVO: 

Obtener medios que posteriormente utilizaremos para cultivar.

MATERIAL:

• Balanza.
• Vidrio de reloj o papel de aluminio. 
• Cucharilla‐espátula. 
• Agua destilada. 
• Probeta.  
• Pipeta.
• Matraz erlenmeyer y tapón para el matraz. 
• Placa calefactora‐agitadora.
• Imán y varilla recogeimanes.
• Medios de cultivo deshidratados. 
• Agua destilada. 
• Placas de Petri.
• Tubos de ensayo.
• Tapones tapones para tubos de ensayo. 
• Autoclave.
• Mechero Bunsen.

PROCEDIMIENTO.

1. Pesar la cantidad correspondiente de medio de cultivo, de acuerdo con los cálculos realizados, y rehidratarlo con la cantidad adecuada de agua destilada. 

1. Calentar el matraz Erlenmeyer, que contiene el medio de cultivo disuelto, en continua agitación, hasta que comience a hervir. Retirar del calor y tapar con un tapón de algodón

1. Envolver el matraz en papel de aluminio y autoclavar a la temperatura y durante el tiempo que nos indique el fabricante del medio (si el tapón es de rosca no se debe cerrar totalmente). 
2. Sacar del autoclave autoclave, enroscar enroscar del todo el tapón y dejar enfriar a una temperatura entre 45‐50ºC.
3. Distribuir el medio en placas de Petri estériles dentro de una campana de flujo laminar o en las proximidades del mechero:                                      • ‐ Quitar el tapón al matraz y flamear bien la boca del matraz para evitar contaminaciones.                                                                                    • ‐ Levantar la tapa, de la placa de Petri estéril, solamente lo necesario para permitir la entrada del cuello del matraz y poder vaciar el agar, e inmediatamente volver a tapar la placa de Petri. 
4. Volver a flamear flamear la boca del matraz y taparlo nuevamente si es que aún contiene medio de cultivo.
5. Dejar que el medio sólido que solidifique e invertir la placa Petri.

PREPARACIÓN DE MEDIO SÓLIDO EN TUBO (SLANT)

1. Pesar el medio de cultivo y rehidratar con agua destilada en un matraz Erlenmeyer. 
2. Fundir el medio de cultivo en una placa calefactora‐agitadora. El medio debe hervir hasta que se vuelva transparente. 
3. Tapar el matraz con un tapón. Dejar enfriar hasta 45‐50ºC
4. Distribuir rápidamente el medio en los tubos antes de que comience a solidificar. Para ello se empleará una pipeta y los tubos no se llenarán más de un tercio de su volumen. 
5. Tapar, con su correspondiente tapón, cada uno de los tubos
6. .Sacar del autoclave y dejar enfriar inclinando, ligeramente, los tubos para obtener el medio en “pico de flauta” o “slant”.