SIEMBRA Y AISLAMIENTO

SIEMBRA Y AISLAMIENTO

OBJETIVO:

Obtener nuevas colonias, para próximas pruebas y sobretodo para saber su procedimiento.

MATERIAL

• Mechero Bunsen. 
• Hisopo .
• Asa e hilo de platino .
• Culltivos bacterianos o muestras .
• Medios de cultivo distribuidos en placas de Petri y en tubo. 
• Gradillas para tubos de ensayo.

PREPARACIÓN DE INÓCULOS A PARTIR DE UN CULTIVO JOVEN O DE UN PRODUCTO PATOLÓGICO.

1. Tomar varias colonias (de 3 a 5) que estén bien aisladas, o bien una porción porción de muestra muestra biológica.
2. Suspenderlas en un tubo que contengan aproximadamente 5 mililitros de agua destilada destilada estéril o un caldo de cultivo
3. Incubar en estufa: – De 18 a 24 horas si la muestra o el cultivo es sólido – hasta conseguir una turbidez del 0,5 de la escala de Mc Farland.

SIEMBRA EN PLACA PARA AISLAMIENTO 

1. Flamear el asa de siembra y enfriarla en las proximidades del mechero 
2. Tomar una muestra del cultivo de microorganismos y extenderla sobre la superficie de una placa Petri que contenga un medio de cultivo. 
3. Distribuir la muestra en un área pequeña de la superficie de la placa, mediante un movimiento en zig‐zag, haciendo estrías muy juntas, pero sin hacer presión para no dañar el agar
4. Flamear el asa, esperar esperar que se enfríe y después  de rozar la siembra realizada previamente, extender de nuevo por otra zona de la placa haciendo nuevas estrías. 
5. Este proceso proceso se repite sucesivamente, flameando y enfriando el asa al comienzo de las sucesivas siembras en estría.
6. Incubar la placa, en estufa, a la temperatura adecuada y siempre en posición invertida. 

Mediante esta técnica se obtienen colonias aisladas a partir de una muestra que contenga un elevado número de bacterias.

SIEMBRA EN TUBO

1. Flamear el asa de siembra y tomar la muestra. 
2. Retirar el tapón del tubo, que contiene el medio de cultivo, cogiéndolo con el dedo meñique de la mano derecha (la misma que sostiene el asa). 
3. Flamear la boca del tubo después de abrirlo.
4. Introducir el asa de siembra hasta el fondo del tubo y seguidamente ir deslizándola, con un movimiento de zig‐zag, por la superficie del medio desde el fondo hasta la parte superior.
5. Volver a flamear la boca del tubo antes de poner el tapón.
6.  Se flamea el asa